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EZH2、UTX与天然产物EGCG在HIV-1转录激活作用中的研究
 
     论文目录
 
摘要第4-5页
Abstract第5页
英文缩写词第6-12页
第1章 绪论第12-24页
    1.1 艾滋病概况第12页
    1.2 HIV-1 Tat 的研究进展第12-14页
        1.2.1 Tat 蛋白的结构与功能第12-13页
        1.2.2 Tat 参与 HIV-1 转录激活的机制第13-14页
        1.2.3 Tat 蛋白的修饰影响其转录激活的活性第14页
    1.3 表观遗传参与基因的表达调控第14-15页
    1.4 组蛋白的甲基化和去甲基化酶修饰第15-16页
    1.5 组蛋白 H3K27 甲基化酶 EZH2 的研究进展第16-19页
        1.5.1 EZH2 的结构与功能第16页
        1.5.2 EZH2 与肿瘤第16-18页
        1.5.3 EZH2 参与细胞分化和器官形成第18页
        1.5.4 EZH2 与其它表观遗传修饰酶的相互作用第18-19页
        1.5.5 EZH2 的抑制剂第19页
    1.6 组蛋白 H3K27 去甲基化酶 UTX 的研究进展第19-21页
        1.6.1 UTX 的结构和功能第19-20页
        1.6.2 UTX 与肿瘤第20页
        1.6.3 UTX 参与细胞分化和器官形成第20-21页
        1.6.4 UTX 参与线虫寿命调节第21页
        1.6.5 UTX 的抑制剂第21页
    1.7 表观遗传学与 HIV-1 感染第21-22页
    1.8 研究内容和目的第22-24页
第2章 EZH2,UTX 及 Tat 突变体质粒的构建第24-32页
    引言第24页
    2.1 实验材料第24-25页
        2.1.1 菌株和质粒第24页
        2.1.2 工具酶和试剂第24-25页
        2.1.3 引物的设计、合成与测序第25页
        2.1.4 主要仪器第25页
        2.1.5 溶液的配制第25页
    2.2 实验方法第25-29页
        2.2.1 突变位点的确定和引物设计第25-26页
        2.2.2 利用 PCR 反应进行质粒的定点突变第26-27页
        2.2.3 琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物第27页
        2.2.4 PCR 产物的消化第27页
        2.2.5 质粒的转化与菌落挑取第27-28页
        2.2.6 质粒提取(碱裂解法)第28页
        2.2.7 质粒测序第28-29页
    2.3 实验结果第29-30页
        2.3.1 EZH2、UTX、Tat 质粒的 PCR 产物第29-30页
        2.3.2 EZH2、UTX、Tat 突变体质粒的转化、提取、测序第30页
    2.4 讨论第30-31页
    2.5 本章小结第31-32页
第3章 EZH2 在 Tat 介导的 HIV-1 转录激活中的作用第32-50页
    引言第32页
    3.1 实验材料第32-34页
        3.1.1 细胞株第32-33页
        3.1.2 试剂与耗材第33页
        3.1.3 主要仪器第33页
        3.1.4 溶液配制第33-34页
    3.2 实验方法第34-41页
        3.2.1 高纯无内毒素质粒提取第34-35页
        3.2.2 细胞的复苏与培养第35页
        3.2.3 细胞转染第35-36页
        3.2.4 MAGI 实验第36页
        3.2.5 细胞存活率分析第36页
        3.2.6 Real-time RCR 检测第36-39页
        3.2.7 Western Blot 检测第39-41页
        3.2.8 统计分析处理方法第41页
    3.3 实验结果第41-47页
        3.3.1 转染不同剂量的 Tat 质粒对 LTR 激活作用的影响第41-42页
        3.3.2 EZH2 siRNA 对 Tat 介导的 LTR 激活作用的影响第42页
        3.3.3 EZH2 的抑制剂 DZNep 对 Tat 介导的 LTR 激活作用的影响第42-43页
        3.3.4 转染 EZH2 质粒及各突变体对细胞内 EZH2 蛋白水平的影响第43-44页
        3.3.5 EZH2 及其突变体过表达对 Tat 介导的 LTR 激活作用的影响第44页
        3.3.6 转染 Tat 质粒对 EZH2 mRNA 水平的影响第44-46页
        3.3.7 转染 Tat 质粒对细胞内 EZH2 蛋白水平的影响第46页
        3.3.8 转染 Tat 质粒对细胞内 H3K27me2、H3K27me3 水平的影响第46-47页
    3.4 讨论第47-48页
    3.5 本章小结第48-50页
第4章 UTX 在 Tat 介导的 HIV-1 转录激活中的作用第50-56页
    引言第50页
    4.1 实验材料第50页
    4.2 实验方法第50-51页
    4.3 实验结果第51-54页
        4.3.1 UTX 的 siRNA 对 Tat 介导的 LTR 激活作用的影响第51页
        4.3.2 转染 UTX 质粒及各突变体对细胞内 UTX 蛋白水平的影响第51-52页
        4.3.3 UTX 及其突变体过表达对 Tat 介导的 LTR 激活作用的影响第52页
        4.3.4 转染 Tat 质粒对 UTX mRNA 水平的影响第52-53页
        4.3.5 转染 Tat 质粒对细胞内 UTX 蛋白水平的影响第53-54页
    4.4 讨论第54页
    4.5 本章小结第54-56页
第5章 EGCG 影响 Nrf2、AKT、AMPK 通路抑制 Tat 介导的 LTR 转录激活第56-60页
    引言第56页
    5.1 实验材料第56-57页
        5.1.1 细胞株第56页
        5.1.2 试剂与耗材第56-57页
    5.2 实验方法第57页
    5.3 实验结果第57-58页
        5.3.1 EGCG 抑制 Tat 介导的 LTR 转录激活及其涉及的信号转导通路第57页
        5.3.2 EGCG 对转染 Tat 质粒的 MAGI 细胞中 Nrf2 蛋白表达的影响第57-58页
        5.3.3 EGCG 对转染 Tat 质粒的 MAGI 细胞中 AKT 和 AMPK 信号通路的 影响第58页
    5.4 讨论第58-59页
    5.5 本章小结第59-60页
结论第60-62页
参考文献第62-68页
附录 A第68-69页
附录 B第69-70页
附录 C第70-72页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第72-74页
致谢第74页

 
论文编号BS3687504,这篇论文共74
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